
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
兔颈动脉内皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
颈动脉组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
上皮样 多角形细胞
分类
兔原代细胞
货号
A01X2027
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)或血管假性血友病因子(vWF)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代内皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
颈动脉存在于脊椎动物颈部的动脉。有颈外动脉和颈内动脉,前者分布至头顶部和颜面部,后者进入颅内分布至脑和眼眶内。
内皮细胞层是血液和其它组织的天然屏障。内皮细胞功能病变是造成动脉粥样硬化的主要原因。内皮细胞同时会合成和分泌凝血和纤维蛋白溶解系统的增强和抑制物,以及影响血小板粘附和聚集的媒介物。它们同时也会分泌控制细胞增殖的蛋白来维持血管壁的健康。
内皮细胞会分泌 t-PA和PAI-1等抗血栓因子以及响应TNF-α,继而分泌细胞因子GM-CSF,表达ICAM-1表面抗体,产生大量的一氧化氮和endotheli⤮タ⤮
公司正在出售的产品:
人干扰素活化基因205(Ifi205)elisa分析检测试剂盒
LCK相互作用膜蛋白抗体
LIME
绒毛膜绒毛体催乳素样蛋白1抗体
CSHL1
组蛋白H3-K23乙酰化检测试剂盒
人C3elisa检测试剂盒
大鼠CXC趋化因子受体4(CXCR4)elisa检测试剂盒
小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)elisa分析检测试剂盒
核仁结构域蛋白NOM1抗体
NOM1
通用转录因子2H亚基3/TTFIIH p34抗体
GTF2H3
四分子交联体14抗体(四旋蛋白) Anti-TSPAN14
磷酸化血小板源性生长因子受体-B抗体 Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr771)
磷酸化泌乳素抗体 Anti-phospho-PRL (Ser163)
突触结合蛋白12抗体 Anti-Synaptotagmin XII
磷酸化着丝粒蛋白A
Phospho-CENPA (Ser7)
嗅觉受体5AU12抗体
OR5B12
原癌基因WIP1抗体 Anti-WIP1/PPM1D
磷酸化细胞核分离基因C蛋白抗体 Anti-phospho-NUDC(Ser326)
环指蛋白123抗体 Anti-RNF123
睾丸凋亡基因抗体 Anti-SRG11/Spata17
大鼠β-防御素(β-Defensins)elisa分析检测试剂盒
兔颈动脉内皮细胞Rabbit IgG / AF680
HDHD1蛋白抗体
BMP antagonist 2; CKTSF1B2; Cysteine knot superfamily 1; Cysteine knot superfamily 1 BMP antagonist 2; DAN domain family member 3; DAND 3; DAND3; GREM 2; Grem2; GREM2_HUMAN; Gremlin 2; Gremlin 2 cysteine knot superfamily homolog; Gremlin-2; Gremlin2; PRDC; Protein related to DAN and cerberus.
兔颈动脉内皮细胞
牛骨骼肌微血管内皮细胞
COV644人卵巢癌细胞
SK-MEL-28人黑素瘤细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。