
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人脾脏单核细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
脾脏。
生长特性
半悬浮培养
细胞形态
半悬浮培养。
分类
人原代细胞
货号
A01X1459
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于脾脏。
2)细胞鉴定:CD14荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:半悬浮培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf原代 巨噬 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
细胞简介:
脾是人体大的器官,分为白髓、边缘区和红髓。脾脏有造血、滤血、衰老血细胞及参与反应等功能。也是细胞迁移和接受抗原刺激后发生应到、产生效应分子的重要场所。
单核细胞是机体防御系统的一个重要组成部分。与其它细胞比较,单核细胞内含有更多的非特异性脂酶,并且具有更强的吞噬作用。它通过吞噬和产生抗体等方式来抵御和消灭入侵的病原微生物。
公司正在出售的产品:
大鼠可溶性CD105 sCD105 elisa检测试剂盒
大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白(E-Cad)elisa检测试剂盒
小鼠抗透明带抗体IgG(aZP-IgG)elisa检测试剂盒
乳酸LD测试盒测全血 50管/48样 比色法
组织胱硫醚-β-合成酶(Cystathionine-β-synthase;CBS)活性比色法定量检测试剂盒
人肺表面活性蛋白D(SP-D)elisa分析检测试剂盒
可溶性/酵母细胞膜蛋白(粗提)制备试剂盒
鱼金属硫蛋白2(MT-2)elisa分析检测试剂盒
大鼠嗜酸性粒细胞过氧化物酶(EPO)elisa检测试剂盒
FAHD1蛋白抗体 FAHD1
FAS凋亡抑制分子2抗体 FAIM2
磷酸化腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体 phospho-ABCA1 (Ser2054)
磷酸化自噬相关蛋白4C抗体 Phospho-ATG4C (Ser398)
代谢型谷氨酸受体5B抗体 MGLUR5
蛋白激酶9抗体 PTK9
锌指蛋白642抗体 ZNF642
锌指蛋白BED4抗体 ZBED4
PE标记人CD62E/CD62P单克隆抗体 human CD62E/CD62P/PE
PTCHD1蛋白抗体 PTCHD1
受体辅助蛋白1抗体 REEP1
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Nek3抗体 NEK3
活化白细胞粘附分子抗体 CD166
肌肉细胞特异性泛素蛋白连接酶1抗体 MuRF1
组蛋白去甲基化酶JMJD5抗体 JMJD5
1号染色体开放阅读框192抗体 C1orf192
细胞CYP1A2蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
人脾脏单核细胞Goat IgM / RBITC
高尔基体膜蛋白抗体
Leukotriene A4 hydrolase LTA4; LTA4 hydrolase; LTA4H; LKHA4_HUMAN.
人脾脏单核细胞
人卵巢微血管内皮细胞
人神经母细胞瘤细胞;sh-sy5y转染突变型
NCTC clone 929 [L cell, L-929]小鼠成纤维细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。