
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人脾成纤维细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
脾脏组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
长梭形细胞
分类
人原代细胞
货号
A01X1454
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于人正常脾脏组织。
2)细胞鉴定:波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
脾是重要的器官,有造血、滤血、衰老血细胞及参与反应等功能。也是细胞迁移和接受抗原刺激后发生应到、产生效应分子的重要场所。脾由被膜、小梁、白髓、红髓、边缘区几部分组成。其中的结缔组织主要是由成纤维洗白构成。
公司正在出售的产品:
人结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)elisa分析检测试剂盒
人B7-H4 elisa分析检测试剂盒
20%中性Formalin固着液
小鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B)elisa分析检测试剂盒
大鼠层粘蛋白α1(LAMA1)elisa检测试剂盒
小鼠GATA结合蛋白4(GATA4)elisa分析检测试剂盒
咖啡阿斯巴塘(aspartame)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒
超氧化物歧化酶(SOD)酵母/裂解样品制备试剂盒
水苏糖含量测试盒
丝氨酸蛋白酶37抗体 Protease serine 37
髓磷酯髓鞘蛋白1单克隆抗体 PLP1
PE标记人CD4单克隆抗体 Human CD4-PE
PSF2蛋白抗体 PSF2
19号染色体开放阅读框44抗体 C19orf44
20号染色体开放阅读框26抗体 C20orf26
磺基转移酶抗体1C2抗体 SULT1C2
肌球蛋白重链9抗体 MYH9
嗅觉受体52E1抗体 OR52E1
血红素抗体 Hemoglobin
蛋白激酶C mu型抗体 PRKD1/PKC mu
蛋白质磷酸酶2A亚基3抗体 PPP2R3
FAM58A蛋白抗体 FAM58A
FITC标记人/小鼠ZAP-70单克隆抗体 human/mouse ZAP-70/FITC
磷酸化周期蛋白依赖激酶抑制因子1C抗体 Phospho-p57 Kip2 (Thr310)
卵母细胞TRO抗体 Magphinin
汞离子检测试剂盒
人脾成纤维细胞小鼠CC趋化因子受体6(CCR-6)elisa分析检测试剂盒
大鼠腺苷受体A2a(ADORA2A)elisa检测试剂盒
B220; CD 45; CD45; cd45 antigen; ec3.1.3.48; CD45R; GP180; GP180; GP 180; L CA; LCA; L-CA; Leukocyte common antigen; LY5; Protein tyrosine phosphatase receptor type C; Protein tyrosine phosphatase receptor type c polypeptide; protein tyrosine phosphatase, receptor type, C; Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C; PTPRC; PTPRC_HUMAN; SCID due to PTPRC deficiency; T200; T200 glycoprotein; T200 leukocyte common antigen; Human homolog of severe combined immunodeficiency due to PTPRC deficiency.
人脾成纤维细胞
人毛囊干细胞
人肝癌细胞;HepAD38
NCI-H929人骨髓瘤细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。