
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人肌腱细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
肌腱组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
梭形细胞
分类
人原代细胞
货号
A01X1431
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)组织来源于术后的人肌腱组织。
2)细胞鉴定:Ⅰ型胶原荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf原代 肌腱 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
细胞简介:
肌腱细胞是肌腱组织的基本功能单位,主要合成和分泌胶原蛋白、弹性蛋白和糖蛋白基质,维持肌腱组织的新陈代谢。
肌腱损伤后的方式包括内源性和外源性,而理想的方式是控制外源性,促进内源性。内源性的机制是肌腱细胞通过细胞自身的增殖从而促进肌腱,但目前肌腱细胞在体外经过多次传代培养后会丧失分裂增殖能力。
目前已知多种因素影响肌腱过程,其中与肌腱关系密切的有着重要调控作用的细胞因子主要有:碱性成纤维生长因子,转化生长因子 β,骨形态发生蛋白-12,血管内皮生长因子,胰岛素样生长因子-1,血小板源性生长因子等。
公司正在出售的产品:
IL-2ELISAkit
鱼巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)elisa分析检测试剂盒
MIF ELISA kit
人补体片段3b受体(C3bR)elisa分析检测试剂盒
HumanC3bRELISAKit
YPD培养基
活性检测试剂盒-CCK8250T
大鼠髓过氧化物酶(MPO)elisa检测试剂盒
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毛发角蛋白34抗体
KRT34
巴尔得-别德尔综合征相关蛋白7抗体
BBS7
精子相关抗原6抗体 Anti-SPAG6
磷酸化Ras相关GTP结合蛋白抗体 Anti-phospho-RPH3AL(Ser232)
磷酸化神经纤毛蛋白1抗体 Anti-phospho-NRP1(Thr916)
磷酸化锌指蛋白598抗体 Anti-phospho-ZNF598(Tyr306)
电压门控钠通道SCN3α蛋白/Na+ CP type IIIα抗体
SCN3A
眼镜蛇蛇毒蛋白抗体
Cobra poison Protein
肿瘤相关胰蛋白酶抑制剂1抗体 Anti-SPINK1/SPINK3
原钙粘蛋白γB5抗体 Anti-PCDHGB5
钙/钙调素依赖蛋白激酶1β/CaMKIβ抗体 Anti-PNCK
星形细胞瘤高表达蛋白抗体(环指蛋白100) Anti-TRIM47
羊抗小鼠IgM
人肌腱细胞细胞色素b5含量测试盒
LoTE分子生物级溶液
CATA_HUMAN; Catalase; EC:1.11.1.6.
人肌腱细胞
人肉芽成纤维细胞
人甲状腺癌细胞; HTh-7 (STR)
NCI-H211 [H211]人小细胞肺癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。