
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人肝门静脉成纤维细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
术后肝门静脉组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
长梭形细胞
分类
人原代细胞
货号
A01X1326
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)组织来源于人的术后肝门静脉组织。
2)细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf原代 成纤维 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
细胞简介:
肝门静脉是一种汇集,在肝门的入口处的一条大静脉,两端连接的都是一些。其作用是将小肠吸收的营养物质运送到肝脏进行,是由静脉到静脉的血管。
肝门静脉的外膜由结缔组织组成,结缔组织主要由成纤维细胞构成。
公司正在出售的产品:
氨待测样品处理试剂盒
细胞环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性比色法定量检测试剂盒
人白介素23(IL-23)elisa分析检测试剂盒
大鼠丙酮酸激酶M2型工酶(M2-PK)elisa分析检测试剂盒
小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)elisa检测试剂盒
肌侧索硬化症相关蛋白4抗体 Anti-Senataxin/SETX
环指蛋白187抗体 Anti-RNF187
神经肽W抗体 Anti-NPW/Neuropeptide W
锌转运体8蛋白抗体 Anti-ZNT8
猪瘟病毒包膜糖蛋白E2抗体 CSFV E2
转录因子MEL1单克隆抗体 PRDM16
胱抑素9/半胱氨酸蛋白酶抑制剂9抗体 CST9
核黄素转运蛋白2抗体 CT054
MYC启动子结合蛋白1抗体 ENO1
NOGO66受体相关蛋白2抗体 NgR2/RTN4RL2
溶质载体转运蛋白家族35成员F2抗体 SLC35F2
肽B/天蚕肽B抗体 Cecropin B
Cullin 4a蛋白抗体 Cullin 4A
DNA甲基转移酶1抗体 DNMT1
磷酸化氨基末端激酶2抗体 phospho-MAPK8 ( Thr183 + Tyr185)
磷酸化果糖-2,6-二磷酸酶3/磷酸果糖激酶2抗体 Phospho-PFKFB3/PFK2 (Ser467)
半乳糖凝集素12抗体 Galectin 12
丙型肝炎病毒-E2/NS1抗体 HCV E2/NS1 protein
线粒体核糖体蛋白L46抗体 MRPL46
锌指蛋白232抗体 ZNF232
小鼠肌球蛋白重链2(MYH2)elisa检测试剂盒
人肝门静脉成纤维细胞Rat D-glyceraldehyde 3-phosphate ELISA Kit
人钩端螺旋体IgM(Lebtospira)elisa分析检测试剂盒
Alpha-s2-Casein; CSN1S2; CASA2_BOVIN; Casocidin-1; Casocidin-I.
人肝门静脉成纤维细胞
人食管癌相关成纤维细胞
人Ph+急淋白血病细胞系;SUP-b15
NCI-H1755人非小细胞肺癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。