
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人附睾平滑肌细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
附睾组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
长梭形
分类
人原代细胞
货号
A01X1381
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)组织来源于人的正常附睾组织。
2)细胞鉴定:α-SMA荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代平滑肌细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
附睾是一个多数曲折、细小的管子构成的器官,一面连接着输精管,一面连接着睾丸的曲细精管。当精子离开睾丸时,就跑到附睾里,继续生长成熟。附睾管除贮存精子外还能分泌附睾液,其中含有某些、酶和特异的营养物质,它们有助于精子的成熟。附睾管由黏膜、肌层和外膜组成。其中,肌层主要是由平滑肌细胞构成。
公司正在出售的产品:
IL-8ELISAKit
鱼(NE)elisa分析检测试剂盒
NE ELISA kit
人层粘连蛋白亚基γ-2(LAMC2)elisa分析检测试剂盒
HumanLAMC2ELISAKit
泛素样蛋白Sumo3抗体 Anti-Sumo 3
环指蛋白167抗体 Anti-RNF167
造血蛋白1抗体 Anti-NCKAP1L/HEM1
锌指蛋白ZBT10抗体 Anti-ZBT10
Kelch样蛋白8抗体
KLHL8
细胞骨架相关蛋白1/微管蛋白折叠辅助因子B抗体
CKAP1
蓬乱蛋白2抗体 Anti-shevelled 2
RAS家族关联结构域蛋白6抗体 Anti-RASSF6
跨膜受体蛋白Notch-2抗体 Anti-Notch 2
锌指蛋白ZBTB39抗体 Anti-ZBTB39
肿瘤抑制基因PEPE1抗体
SASH1
附睾特异蛋白15抗体
LCN15
磷酸化信号转导和转录激活因子5b抗体 Anti-phospho-STAT5b(Ser731)
轴周蛋白PRX抗体 Anti-PRX/periaxin
成对样源结构域转录因子2抗体 Anti-PITX2
髓系细胞触发受体样转录因子1抗体 Anti-TREML1/TLT1
兔抗人IgG(γ-链)恒定区抗血清
人附睾平滑肌细胞Rabbit Anti-Chicken IgM / Gold
多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶1抗体
Spermatogenesis-associated protein 12; Spermatogenesis associated 12; Spermatogenesis-related protein 5; SPT12_HUMAN; SPATA12; SRG5; Testis Spermatogenesis Related Gene5.
人附睾平滑肌细胞
人视网膜Muller细胞
人涎腺腺样囊性癌细胞;SACC-83
NCI-h1688人经典小细胞肺癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。