
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
大鼠主动脉弓内皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
主动脉组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
上皮样 多角形细胞
分类
大鼠原代细胞
货号
A01X1545
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)或血管假性血友病因子(vWF)荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf 原代内皮 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
内皮细胞在切应力的作用下,分泌不同的内皮因子并进而影响血管收缩和生长。主动脉内皮细胞也调节细胞黏附分子的表达来控制和**调节炎症反应和组织纤维化。体外培养的原代主动脉内皮细胞可有效地帮助研究者研究内皮功能失调的机理,动脉粥样化等的发病机理以及发展新的方法。
公司正在出售的产品:
CHATELISAkit
干扰素α21抗体
IFNA21
嗜乳脂蛋白亚家族2成员A2抗体
BTN2A2
组织半胱-13(CASPASE-13)活性比色法定量检测试剂盒
过氧化氢检测试剂盒500T
测分型SODCu-Zn、Mn、总 100管/48样 50管/24样
小鼠抗平滑肌抗体(ASMA)elisa检测试剂盒
恶性纤维组织细胞瘤抗体
MFHA1/Malignant fibrous histiocytoma
脱氢肽酶1抗体
DPEP1
紧密连接蛋白2抗体 Anti-TJP2
视网膜色素上皮细胞特异性蛋白65抗体 Anti-RPE65
核受体辅助抑制因子1抗体 Anti-NCoR1
玻璃粘连蛋白抗体 Anti-VTN/Vitronectin
TRA2B蛋白抗体
TRA2B
线粒体核糖体蛋白L50抗体
MRPL50
14号染色体开放阅读框174 Anti-SAMD15/C14orf174
泛素特异性蛋白酶OTB1抗体 Anti-OTUB1
磷酸化p21激活激酶2抗体 Anti-phospho-PAK2(Ser141)
跨膜丝氨酸蛋白酶5抗体 Anti-TMPRSS5
辣根过氧物酶标记小鼠IgG
大鼠主动脉弓内皮细胞Rabbit Anti-Rat IgG H&L / Cy7
FAM23A蛋白抗体
PARP 5a; PARP5A; PARPL; pART5; Poly [ADP-ribose] polymerase 5A; TANK 1; TANK1; Tankyrase 1; Tankyrase I; Tankyrase TRF1 interacting ankyrin related ADP ribose polymerase; Tankyrase-1; Tankyrase1; TankyraseI; TIN 1; TIN1; TINF 1; TINF1; TNKS 1; TNKS; TNKS-1; TNKS1; TNKS1_HUMAN; TRF1 interacting ankyrin related ADP ribose polymerase; TRF1-interacting ankyrin-related ADP-ribose polymerase.
大鼠主动脉弓内皮细胞
人星形胶质细胞
Y79人视网膜母细胞瘤细胞
MonoMac6人急性单核细胞白血病细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。