
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
大鼠肾足细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
肾脏组织
生长特性
贴壁培养
细胞形态
不规则 含足突细胞
分类
大鼠原代细胞
货号
A01X1590
用途
仅供科研实验
细胞特性:
1)细胞来源于实验动物正常肾脏组织。
2)细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)或WT-1(Wilm'sTumorProtein)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:不规则,含足突细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf 原代肾足 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
肾小球为血液过滤器,肾小球壁构成过滤膜。肾小球过滤膜从内到外有三层结构:内层为内皮、中层为肾小球基膜、外层为上皮细胞层,上皮细胞又称足细胞,其不规则突起称足突,其间有许多狭小间隙,血液经滤膜过滤后,滤液入肾小球囊。在正常情况下,血液中绝大部分蛋白质不能滤过而保留于血液中,仅小分子物质如尿素、葡萄糖、电解质及某些小分子蛋白能滤过。
肾足细胞即肾小球上皮细胞,它附着于肾小球基底膜的外侧,连同肾小球基底膜和肾小球基膜一起构成了肾小球血液滤过屏障。又由于正常成年机体的肾脏足细胞是一种终末分化细胞,体外培养的原代细
公司正在出售的产品:
小鼠白细胞介素4(IL-4)elisa检测试剂盒
山羊C反应蛋白(CRP)elisa检测试剂盒
植物组织膜性囊泡(vacuole)分离试剂盒
植物硝态氮测试盒 50T/48样 比色法
大鼠糖原磷酸化酶(GP)elisa检测试剂盒
睾丸蛋白聚糖2抗体 Anti-SPOCK2/Testican 2
复制激活因子C2抗体 Anti-RFC2
转录延伸因子NELF抗体 Anti-NELF
核转录调节因子YY1抗体 Anti-YY1
纤维母细胞生长因子5抗体 FGF5
线粒体前体蛋白TIMM23抗体 TIMM23
γ干扰素诱导蛋白IP30抗体 IFI30
白介素18抗体 IL18
BRPF3蛋白抗体 BRPF3
CD3D抗体 CD3D
离子转运相关蛋白SLC7A9抗体 SLC7A9
磷酸化CREB转录共激活因子TORC2抗体 Phospho-TORC2 (Ser171)
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体抗体 TRAIL
轴突蛋白3抗体 NRXN3
睾丸特异性DMRT3蛋白抗体 DMRT3
骨形态发生蛋白5抗体 BMP5
L型氨基酸转运蛋白3抗体 LAT3
MS4A6E蛋白抗体 MS4A6E
人状瘤病毒E6相关蛋白抗体 UBE3A
乳腺癌、胃癌抗原GA55抗体 TACC1
大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)elisa分析检测试剂盒
大鼠肾足细胞Mouse Anti-Human IgM / Cy3
FBXL3蛋白抗体
LAMA; LAMA1; Laminin A chain; Laminin subunit alpha-1; Laminin-1 subunit alpha; Laminin-3 subunit alpha; S-laminin subunit alpha; S-LAM alpha; Laminin subunit alpha-1; LAMA1_HUMAN; Laminin-1 subunit alpha; Laminin-3 subunit alpha. Laminin α-1; Laminin α1; Laminin α 1; Laminin subunit α1; Laminin subunit α-1.
大鼠肾足细胞
人直肠平滑肌细胞
LX-2+GFP人肝星形细胞+GFP
ME-180人表皮样癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。