
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
小鼠胰岛细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
胰腺组织
生长特性
贴壁
细胞形态
梭形、多角形
分类
小鼠原代细胞
货号
A01X1856
用途
仅供科研实验
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
小鼠胰岛细胞分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰岛细胞作为糖尿病新药的细胞筛选模型需保持其结构完整、生理功能稳定和足够长的存活时间。胰岛占胰腺总质量的1%-2%,每个胰岛大概含有1000个细胞。胰岛移植可消除常规产生的严重低血糖症状,具有创伤小及并发症少等优点,是有前景的Ⅰ型糖尿病方案。移植胰岛的获得需经过供体筛选、胰腺消化、胰岛分离纯化及结果鉴定等步骤,分离纯化效果取决于原料及操作方法的选择。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠胰岛细胞采用胶原酶灌注消化法结合密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠胰岛细胞经DTZ染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
5’核苷酸酶EC3.1.3.5 1 KU/瓶
Kelch样蛋白14抗体
KLHL14
钙和整合素结合蛋白4抗体
CIB4
细胞/组织活性高尔基体分离试剂盒
大鼠无翅型MMTV整合位点家族成员3A(WNT3A)elisa检测试剂盒
细胞色素P450亚酶CYP2E1(MFC)活性荧光定量检测试剂盒
小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)elisa检测试剂盒
NDUFAF6蛋白抗体
NDUFAF6
甘丙肽受体拮抗剂抗体
Galantide
味觉感受器蛋白T2R6抗体 Anti-TAS2R7/T2R6
血小板源性生长因子受体β样蛋白抗体 Anti-PDGFRL
外致密纤维蛋白3B抗体 Anti-ODF3B
14-3-3 protein ζ/δ抗体 Anti-14-3-3 zeta/delta
磷酸化原癌基因CBL2抗体
phospho-CBL(Tyr674)
核斑点剪接调控蛋白1抗体
NSRP1
血管粘附蛋白1抗体 Anti-VAP1
膜相关磷脂转运蛋白抗体 Anti-NIR1/RDGBA3
类风湿因子抗体 Anti-RF/Rheumatoid Factor
TRIM35蛋白抗体 Anti-TRIM35
大鼠丙二醛(MDA)elisa分析检测试剂盒
小鼠胰岛细胞MDA ELISA Kit
人激肽释放酶10(KLK 10)elisa分析检测试剂盒
Cannabinoid Receptor I; CANN 6; CANN6; Cannabinoid receptor I brain; CB 1; CB R; CB1; CB1A; CB1K5; CbR; Central cannabinoid receptor; Central cannabinoid receptor isoform a; Central cannabinoid receptor isoform b; CNR 1; CNR; CNR-1; CNR1_HUMAN.
小鼠胰腺导管上皮细胞
兔结膜上皮细胞
大鼠骨髓瘤细胞;IR983F
KYSE-270人食管鳞状癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。