
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
小鼠食管上皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
食管组织
生长特性
贴壁
细胞形态
上皮细胞样
分类
小鼠原代细胞
货号
A01X1799
用途
仅供科研实验
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
小鼠食管上皮细胞分离自食管组织;食管是咽和胃之间的消化管,食管在系统发生上起初很短,随着颈部的伸长和心肺的下降,而逐渐增长。食管可分为颈段、胸段和腹段。脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之间的纵膈内,胸段通过膈孔与腹腔内腹相连,腹段很短与胃相连。在发育过程中,食管的上皮细胞增殖,由单层变为复层,食管使管腔变狭窄,甚至一度闭锁,以后管腔又重新出现。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层:黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中,黏膜层,包括上皮、固有层和黏膜肌层。上皮为较厚的未角化的复层扁平上皮,耐摩擦,有保护作用。在食管与胃贲门交界处,复层扁平上皮突然变成单层柱状上皮。食管被一层线性排列的、无角化、潮湿的复层扁平上皮细胞覆盖,其顶端细胞膜和细胞间连接复合体联合在一起产生有效渗透屏障,防止食管内容物的渗入。特别的是,层屏障使表层细胞的基质外侧细胞膜和深层细胞的全部细胞膜不暴露于食管腔内规律的大幅波动的渗透压之下。从组织学上讲,食管上皮由两层组成,基底层和分化层;其中,仅基底层的细胞可以增殖,然后向食管腔移行。移行过程伴随有分化的发生和分化标记的依序表达。食管上皮细胞的培养是研究食管正常生理机制和食管癌变机制的非常好的体外模型。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠食管上皮细胞采用机械分离法结合组织贴块法,并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠食管上皮细胞经PCK荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)elisa检测试剂盒
小鼠白细胞介素3(IL-3)elisa检测试剂盒
仓鼠心肌肌钙蛋白I(TNNI3)elisa检测试剂盒
冰冻切片组织CYTOCHROME C蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
牛血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)elisa分析检测试剂盒
鱼Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)elisa分析检测试剂盒
大鼠神经营养因子4(NT-4)elisa检测试剂盒
组织人体腺病毒(adenovirus)定量PCR扩增检测试剂盒
豚鼠内皮素1(EDN1)elisa检测试剂盒
20号染色体开放阅读框117抗体 C20orf117
3号染色体开放阅读框58抗体 C3orf58
肌球蛋白5A抗体 MYO5A
激活素A受体1B抗体 ACVR1B
PRDM锌指转录因子PRDM13抗体 PRDM13
ras癌基因家族RAB20单克隆抗体 RAB20
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶16抗体 STK16
丝裂原活化蛋白激酶MKK7抗体 MEK7
FER1L5蛋白抗体 FER1L5
FITC标记小鼠CD69单克隆抗体 mouse CD69/FITC
磷脂酰肌醇激酶催化亚单位A抗体 PIK3CA
毛细管形态发生蛋白1抗体 CMG1
蛋白酶调解因子7抗体 PSMD7
凋亡相关蛋白7抗体 PDCD7
信号诱导增殖相关蛋白1抗体 SIPA1
氧化还原酶NDOR1抗体 NDOR1
大鼠载脂蛋白B48(Apo B48)elisa检测试剂盒
小鼠食管上皮细胞动物组织氧化应激活性氧(ROS)光泽精化学发光法定量检测试剂盒
豚鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)elisa检测试剂盒
60S acidic ribosomal protein P1; p32; p34; REPA2; Replication factor A protein 2; Replication protein A 32 kDa subunit; Replication protein A 32kDa subunit; Replication protein A 34 kDa subunit; Replication protein A; Replication Protein A2 (32kDa); Replication protein A2; Replication protein A2, 32kDa; RF-A protein 2; Rf-A2; RFA; RFA2_HUMAN; RP-A p32; RP-A p34; RP21C; RPA 2; RPA 32; RPA; Rpa2; RPA32; RPA34; RpLP1; RpP2.
小鼠视网膜前体细胞
兔内皮祖细胞
H9C2大鼠心肌细胞
KASUMI-1人红白血病细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。