
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
小鼠肾动脉内皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
肾组织
生长特性
贴壁
细胞形态
内皮细胞样
分类
小鼠原代细胞
货号
A01X1797
用途
仅供科研实验
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
小鼠肾动脉内皮细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是**尿液,借以体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有功能,**肾素、促红细胞**素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分的降解场所和肾外的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾动脉的分支为叶间动脉,穿行于肾柱内,上行至皮质与髓质交界处,形成与肾表面平行的弓状动脉。小叶间动脉向被膜发出,并向周围的肾小体发出入球小动脉,进入肾小囊后形成球形的网,再汇集成出球小动脉,出肾小体。直小动脉分支形成网,再汇合成直小静脉,入弓状静脉、叶间静脉,后汇合成肾静脉经肾门出肾,注入下腔静脉。肾动脉既是肾的营养血管,又是肾的机能血管,与肾泌尿机能密切相关。肾动脉在肾实质内形成两个网:肾小球网,血压较高,利于血浆滤过形成原尿;球后网,血压较低,利于肾小管的重吸收。肾动脉内皮细胞是肾动脉的重要结构细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。肾动脉内皮细胞主要功能有:①在血浆滤过形成原尿的过程中起重要作用,②在肾小管的重吸收过程中起重要作用,③保持凝血和纤溶的动态平衡。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠肾动脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠肾动脉内皮细胞经CD31荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
大鼠胶原吡啶交联(PYD)elisa检测试剂盒
白细胞介素增强子结合因子3抗体
ILF3
1号染色体开放阅读框227抗体
C1orf227
羊环磷酸鸟苷(cGMP)elisa分析检测试剂盒
大鼠趋化因子C-X-C-基元配体16(CXCL16)elisa检测试剂盒
CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒标准曲线
豚鼠白介素22(IL-22)elisa检测试剂盒
多发性骨髓瘤相关蛋白2抗体
MMTAG2
双特异性蛋白磷酸酶7抗体
DUSP7
跨膜蛋白166抗体 Anti-TMEM166
CASP2凋亡相关蛋白抗体 Anti-RAIDD
非霍奇金瘤重复蛋白2抗体 Anti-NHLRC2
棕榈酰化膜蛋白6抗体 Anti-VAM1/MPP6
甲状腺受体相互作用15抗体
TRIP15
线粒体核糖体蛋白S27抗体
MRPS27
SH2结构域转化蛋白1抗体 Anti-SHC
氧化应激反应蛋白1抗体 Anti-OXSR1/OSR1
磷酸化嗜中性粒细胞胞浆因子4抗体 Anti-Phospho-p40phox (Thr154)
四分子交联体5抗体(四旋蛋白) Anti-TSPAN5
大鼠谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)elisa分析检测试剂盒
小鼠肾动脉内皮细胞GSTP1 ELISA kit
豚鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa分析检测试剂盒
ATG8A; FLC 3B; FLC3B; FLJ25768; GABA(A) receptor associated protein; GABA(A) receptor-associated protein; GABARAP a; Gamma aminobutyric acid receptor associated protein; Gamma-aminobutyric acid receptor-associated protein; GBRAP_HUMAN; MGC120154; MGC120155; MM 46; MM46.
小鼠肾动脉平滑肌细胞
兔脾基质细胞
大鼠
JMSU1人膀胱癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。