
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
小鼠滑膜成纤维细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
滑膜
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
分类
小鼠原代细胞
货号
A01X1895
用途
仅供科研实验
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传1-2代左右
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
小鼠滑膜成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞简介:
小鼠滑膜成纤维细胞分离自滑膜组织;滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构,各种关节内均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构,同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎(OA)以关节软骨退行性变为特征,其病理改变累及关节的各个组成部分,但绝不仅局限于软骨,还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响,相互作用,共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的大细胞群体,是维持关节正常功能的重要组织结构,它包埋在颗粒状无定性的基质中,基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型(巨噬样滑膜细胞)、B型(成纤维样滑膜细胞)以及C型(树突细胞样滑膜细胞)细胞组成。滑膜细胞主要功能:①滑膜细胞产生润滑液成分,并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关;②滑膜细胞增生,表现为不依赖于支持物生长,并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏;③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。
方法简介:
实验室分离的小鼠滑膜成纤维细胞采用混合酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的小鼠滑膜成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
药品糖精(saccharin)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒
NK细胞抑制性受体3DX1抗体
KIR3DX1
转录调节蛋白BACH1抗体
BACH1
小鼠糖原合酶激酶3α(GSK3α)elisa检测试剂盒
大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)elisa检测试剂盒
组织磷酸二酯酶2(PDE2)活性荧光定量检测试剂盒
人妊娠相关蛋白A(PAPP-A)elisa检测试剂盒
NDUF3蛋白抗体
NDUF3
6号染色体开放阅读框165抗体
C6orf165
5色氨酸羟化酶2抗体 Anti-TPH2
鸭甲型肝炎聚蛋白抗体 Anti-duck hepatitis A virus polyprotein
嗅觉受体家族10亚基J3抗体 Anti-OR10J3
2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)单克隆抗体 Anti-2,4-D(24D1)
磷酸化糖皮质受体DNA结合因子1抗体
phospho-GRLF1 (Tyr1105)
DNA聚合酶α2抗体
DNA polymerase subunit II
上皮型钙粘附分子抗体 Anti-VE Cadherin
神经激肽A受体/K物质受体抗体 Anti-NK-2R/Neurokinin A Receptor
环指蛋白41抗体 Anti-RNF41
磷酸丙糖异构酶抗体 Anti-Triosephosphate isomerase
大鼠补体蛋白4(C4)elisa分析检测试剂盒
小鼠滑膜成纤维细胞C4 ELISA Kit
人集蛋白亚家族成员11(COLEC11)elisa分析检测试剂盒
BABPB2; E4TF1; E4TF1-47; E4TF1-53; E4TF1B; GA binding protein transcription factor, beta subunit 1; GA binding protein transcription factor, beta subunit 2; GABP subunit beta-1; GABP subunit beta-2; GABPB; GABPB-1; GABPB-2; GABPB2; NRF2B1; NRF2B2; Nuclear respiratory factor 2; Transcription factor E4TF1-47; Transcription factor E4TF1-53; GABP2_HUMAN.
小鼠滑膜间充质干细胞
兔食管平滑肌细胞
MC3T3-E1subclone 14小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14
HTMC人眼小梁网细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。