
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
人破骨细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
骨髓
生长特性
贴壁
细胞形态
多核巨细胞
分类
人原代细胞
货号
A01X1420
用途
仅供科研实验
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 多核巨细胞
传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
人破骨细胞分离自骨组织和骨髓;破骨细胞是骨组织中的多核巨细胞,位于骨组织表面的浅凹处。目前一般认为破骨细胞是分离自骨骼外的造血系统,其前体可能属于造血干细胞的前单核细胞。破骨细胞的主要功能是维持骨吸收和骨形成的相对平衡,若失去这种平衡则发生病理性变化。因此多数学者从破骨细胞着手研究破骨细胞的结构、功能探讨骨吸收,形成相互平衡的机制。但破骨细胞是一种终末分化细胞,属于不增殖细胞群,不能增殖和传代,只能进行原代培养且存活时间较短。
方法简介:
公司实验室分离的人破骨细胞采用机械分离法/密度梯度离心法和骨髓单核细胞诱导法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人破骨细胞经TRAP染色检测,纯度可达30%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
小鼠胱天蛋白酶10(CASP-10)elisa分析检测试剂盒
豚鼠球蛋白A(IgA)elisa分析检测试剂盒
通用型宋内志贺菌Shigella sonnei 基因检测试剂盒
活体组织线粒体内膜功能/膜电位测定试剂盒
大鼠载脂蛋白C-I(APOC1)elisa检测试剂盒
人变肾上腺素(MN)elisa分析检测试剂盒
白三烯C4(LTC4)高效液相色谱法定量检测试剂盒
小鼠胰脂肪酶(PL)elisa检测试剂盒
大鼠流行性出血热IgG抗体elisa检测试剂盒
FAM73A蛋白抗体 FAM73A
FITC标记人CD13单克隆抗体 human CD13/FITC
磷酸化周期素依赖性激酶5抗体 phospho-CDK5 (Tyr15)
流感病毒H3N7血凝素抗体 H3N7 hemagglutinin
蛋白激酶C抗体 PKA C alpha + beta
登革热病毒2糖蛋白NS1抗体 DENV-2 NS1
锌指蛋白84抗体 ZNF84
性结合球蛋白抗体 SHBG
PRKR相互作用蛋白1抗体 PRKRIP1
ras癌基因家族Rab3b单克隆抗体 RAB3B
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2抗体 NRK2/NEK4
丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶3抗体 MAPKAP3
肌球蛋白9B抗体 MYO9B
激活素受体2B抗体 Activin Receptor Type IIB
12号染色体开放阅读框52抗体 RITA
20号染色体开放阅读框134抗体 C20orf134
大鼠内皮素转换酶1(ECE1)elisa检测试剂盒
人破骨细胞鸭球蛋白E(IgE)elisa分析检测试剂盒
人蛋白C(PC)elisa分析检测试剂盒
ACOX 2; Acyl Coenzyme A oxidase 2; Acyl Coenzyme A oxidase 2 branched chain; Acyl coenzyme A oxidase 2 peroxisomal; BCOX; BRCACOX; BRCOX; Peroxisomal branched chain acyl CoA oxidase; THCA CoA oxidase; THCCox; Trihydroxycoprostanoyl CoA oxidase; 3 alpha 7 alpha 12 alpha trihydroxy 5 beta cholestanoyl CoA oxidase; 3 alpha 7 alpha12 alpha trihydroxy 5 beta cholestanoyl CoA 24 hydroxylase; ACOX2_HUMAN.
人脐动脉内皮细胞
小鼠前列腺基底细胞
MCF-10A人乳腺上皮细胞
CHO仓鼠卵巢细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。