培养方法与步骤：
①动物处理：用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡，然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒（浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内，影响培养）后迅速置于的培养皿中，带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材：将乳鼠俯卧位，用乙醇进行一次背部，再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤，剖开腹部，取出肝脏放入另一培养皿中，除去其他连带组织，用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次，每次1~2 ml，洗去血污，将废液弃于废液杯中。
③组织分离：用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除，然后将肝组织反复剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小块后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次，弃废液。
④接种：用吸管加2滴小牛血清，小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液，然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地（组织块之间相距约0.5 cm左右）排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。
⑤培养：将培养瓶慢慢翻转，使瓶底向上，加入1~2 ml培养液，拧紧瓶盖，做好标记，置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时，待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后，再缓慢翻转培养瓶（尽量注意不要使组织块漂浮起来），另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块，将瓶盖调整在略微松弛状态，继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察：细胞接种后一般几个小时内即可贴壁，并开始生长。如果无污染且细胞生长良好，可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色，此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞，这时可进行传代培养。
产品名称
人脑微血管内皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
脑组织
生长特性
贴壁
细胞形态
内皮细胞样
分类
人原代细胞
货号
A01X1504
用途
仅供科研实验
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞简介：
人脑微血管内皮细胞分离自脑组织；脑微血管内皮细胞是血脑屏障的主要组成成分，它是组成脑微血管腔面单层扁平上皮样细胞，能够限制可溶性物质和细胞等从血液进入大脑，大脑微血管内皮细胞与外周内皮细胞相比具有一些相同特性。它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用，在脑血管的发病机制中有重要病理生理学意义。与外周内皮细胞相同，大脑微血管内皮细胞表面表达细胞粘附分子，调控白细胞进入大脑。由于微血管内皮细胞的器官特异性，内皮细胞通常取源于研究的相关组织。其主要特征如下：①脑微血管内皮细胞存在许多细胞间紧密连接，产生很高的跨内皮阻抗，延迟细胞旁的通量；②脑微血管内皮细胞缺乏内皮细胞的窗孔结构，其液相物质胞饮水平较低；③脑微血管内皮细胞具有不对称定位酶和载体介导转运系统，从而产生“两极分化”的表现型。
方法简介：
公司实验室分离的人脑微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的人脑微血管内皮细胞经CD31荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
PRL/LTHELISAKit
鸽子白蛋白(Albumin)elisa分析检测试剂盒
Pigeon Albumin ELISA Kit
人单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体IgM(HSVⅡ-Ab)elisa分析检测试剂盒
HSVⅡ-AbELISAKit
豚鼠球蛋白E(IgE)elisa检测试剂盒
氨肽酶B（aminopeptidase B）
细胞总抗氧化能力（TAC）比色法（DDPH）定量检测试剂盒
腺苷脱氨酶ADA测试盒 100管/48样 比色法
钙激活钾通道蛋白β4抗体
KCNMB4
细胞粘附分子相关蛋白/癌基因下调蛋白抗体
CDON
牛生长(GH)elisa分析检测试剂盒
血液过氧化氢（HYDROGEN PEROXIDE）活性荧光定量检测试剂盒
小鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa检测试剂盒
大鼠胆囊收缩素八肽(CCK-8)elisa检测试剂盒
环指蛋白41抗体
RNF41
KLF15蛋白抗体
KLF15
染色体结构维持蛋白6抗体 Anti-SMC6
磷酸化蛋白磷酸酶1C抗体 Anti-phospho-PTPN6(Tyr564)
原钙粘蛋白γC3抗体 Anti-PCDHGC3/PCDH2
泛素蛋白连接酶E2I抗体 Anti-SUMO-1/UBC9
胶体金标记的兔抗小鼠IgM
人脑微血管内皮细胞Rabbit Anti-Mouse IgM / Gold
甘丙肽受体3抗体
GADL1; GADL1_HUMAN; Glutamate decarboxylase like 1; Glutamate decarboxylase-like protein 1; MGC138191; OTTHUMP00000161199; OTTHUMP00000222306.
人膀胱成纤维细胞
小鼠乳腺成纤维细胞
LS513人结直肠癌细胞
CHO/dhFr-仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷
原代细胞步骤：
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织，剔除包膜及坏死组织，无菌PBS清洗3-5次；切成约1mm3组织块；
2. 加入2mmol 的 EDTA，摇匀后放置冰上约 30-60min；
3. 离心，并加入胶原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期间，置于37°培养箱。每15min摇晃一次，消化时间根据肿瘤组织来定，约1-2h；
5. 待大部分组织块消化成透明状时，用 40μm 的细胞滤网过滤细胞，收集；
6. 用培养基重悬，置于培养箱培养。