
细胞简介:

大鼠脂肪细胞分离自脂肪组织;脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成,聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶;贮存的脂肪,在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸,经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应,参与多种重要病理生理过程;脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的系统。脂肪细胞分为白色脂肪细胞和褐色(棕色)脂肪细胞,常呈白色,在婴幼儿期大量增殖,到青春期数量达到,此后数量一般不再增加。细胞内含有大量富含脂肪的小泡,称为脂质泡,富含光面内质网。此外,还有一种褐色脂肪细胞,在动物体内主要存在于肩胛骨间、颈背部、腋窝、纵隔及肾脏周围,含有高度团缩的褐色脂肪,作用是将脂质分解产热,调节体内脂质比例。
组织来源 |
产品规格 |
货号 |
用途 |
脂肪组织 |
5×105cells/T25细胞培养瓶 |
A01X1670 |
仅供科研研究实验 |
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介:
公司实验室分离的大鼠脂肪细胞采用胰蛋白酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠脂肪细胞经油红O染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
实验具体步骤:

(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净;
(3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中;
(4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
(6)种植组织块:将上述组织使用2X双抗冰冷PBS洗涤3次,每次5min,然后使用完全培养基(含有1X双抗)洗涤一次。经过的心脏破碎组织块经过离心后,可以用细头
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的
盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);

(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
(8)贴壁细胞传代:当单个细胞从组织块爬出面积在组织块3-5倍,进行传代,此时可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化组织块爬出的细胞,消化时间根据正常细胞消化时间即可,当然可以在消化过程中不断管擦爬出细胞的皱缩情况,一旦达到消化完成(皱缩细胞≥70%)即可使用完全培养基终止消化。在吹打单个细胞时候,一定要轻柔/缓慢,不能吹打到组织块,如果组织块掉下来,大概率是不会再贴壁成功啦。根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;
(9)鉴定:细胞在传代至代、第五代、第十代时候可以将部分细胞进行鉴定,鉴定办法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式细胞术等。实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。
二、实体组织材料的分离方法
对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
公司正在出售的产品:
食物糖精(saccharin)含量薄层色谱法定性检测试剂盒
MCEE蛋白抗体
MCEE
白喉A抗体
Diphtheria toxin fragment A
互养蛋白1,2,3抗体 Anti-Syntrophin-1+2+3
Rh血型C抗原抗体 Anti-RHCE
新的饱食分子蛋白抗体 Anti-Nesfatin-1/Nucb2
锌指蛋白ZBTB3抗体 Anti-ZBTB3
磷酸羧化酶2抗体
PCK2
绒毛膜癌不表达蛋白1抗体
HOPX
磷酸化结节性硬化症蛋白1抗体 Anti-phospho-TSC1(Ser505)
猪蓝耳病M蛋白抗体 Anti-PRRSV M protein
蛋白磷酸酶H1抗体 Anti-PTPH1/PTPN3
快速发育生长因子源蛋白2抗体 Anti-Sprouty 2
Cy3标记的兔抗狗IgG H&L
Rabbit Anti-Dog IgG H&L / Cy3
磷酸化细胞分化周期蛋白37抗体
phospho-CDC37 (Ser13)
受精卵抑制蛋白1抗体 Anti-ZAR1/Zygote arrest protein 1
NADPH氧化酶活化蛋白1抗体 Anti-NOXA2/p67phox
磷酸化细胞周期检控Rad17蛋白抗体 Anti-Phospho-Rad17 (Ser645)
分泌和跨膜蛋白1抗体 Anti-SECTM1
大鼠Ⅵ型胶原(Col Ⅵ)elisa分析检测试剂盒
大鼠脂肪细胞Col Ⅵ ELISA Kit
人甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽1(C4/C2 RA反应因子的激活因子)(MASP1)elisa分析检测试剂盒
UPF0428 protein CXorf56; CX056_HUMAN.
大鼠主动脉内皮细胞
小鼠室管膜细胞
HT-1080人纤维肉瘤细胞
C6+LUC大鼠脑胶质瘤细胞绿色荧光标记