
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
大鼠小肠黏膜上皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
小肠组织
生长特性
贴壁
细胞形态
上皮细胞样
分类
大鼠原代细胞
货号
A01X1560
用途
仅供科研实验
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
大鼠小肠黏膜上皮细胞分离自小肠组织;小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的,因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后,基本上完成了消化过程,同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞,粘膜有许多绒毛,绒毛根部的上皮下陷至固有层,形成管状的肠腺,其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切;构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和细胞与绒毛上皮相似,接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似,绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短,不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能,其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力,促使食物向下运动。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障,持续暴露于大量抗原中,也是机体面对病原微生物的道防线。因此,肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外,在黏膜先天性和获得性防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为首先接触抗原的细胞,在黏膜反应的起始阶段发挥关键作用,它决定黏膜反应的发生、性质和强度。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠小肠黏膜上皮细胞采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠小肠黏膜上皮细胞经Cytokeratin-18荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
NF-κBELISAKit
猴分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)elisa分析检测试剂盒
SFRP1 ELISA kit
人二氢嘧啶酶样3(DPYSL3)elisa分析检测试剂盒
DPYSL3ELISAKit
线粒体促凋亡蛋白抗体 Anti-Smac/DIABLO
RAS癌基因相关蛋白RAB17抗体 Anti-Rab17
神经元衍生孤儿受体1抗体 Anti-NOR1
乙型肝炎X蛋白HBX抗体 Anti-X protein/HB-X (middle)
果蝇inaD蛋白抗体
inaD
1号染色体开放阅读框98抗体
C1orf98
GSK-3ALPHA蛋白表达西方杂交分析试剂盒
牛胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP-5)elisa分析检测试剂盒
乳酸含量试剂盒
小鼠巨嗜细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2)elisa检测试剂盒
前列环素受体抗体
Prostaglandin I2 Receptor
干扰素alpha 7蛋白抗体
IFNA7
结肠癌抗原16抗体 Anti-UTP14A/SDCCAG16
妊娠相关血浆蛋白A2抗体 Anti-PAPP A2
棕榈酰蛋白水解酶2抗体 Anti-PPT2
硫酸酯酶2蛋白抗体 Anti-Sulfatase 2
PE-Cy3标记的羊抗人IgM
大鼠小肠黏膜上皮细胞Goat Anti-Human IgM / PE-Cy3
原癌基因FRAT1抗体
CRMP2 (phospho T514 + S518); CRMP2 (phospho T514+S518); CRMP-2(phospho Thr514+S518); p-CRMP2(Thr514+S518); CRMP2/Dpysl2(DRP 2; Collapsin response mediator protein 2; Collapsin response mediator protein hCRMP 2; CRAM; CRMP 2; DHPRP 2; DHPRP2; Dihydr pyrimidinase 2; Dihydropyrimidinase 2; Dihydropyrimidinase like 2; Dihydropyrimidinase like 2 long form;Dihydropyrimidinase related protein 2; DPYL 2; DPYL2; DPYSL 2; DPYSL2; DRP 2; DRP2; Musunc 33; Musunc33; N2A3; TOAD 64; TOAD64; ULIP 2 protein; Ulip2.
产品类型;磷酸化抗体
大鼠小肠平滑肌细胞
小鼠心房心肌细胞
HEL人红白细胞白血病细胞
BICR 78人头颈部鳞状细胞癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。