
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
胎盘组织
生长特性
贴壁
细胞形态
梭形、多角形
分类
大鼠原代细胞
货号
A01X1757
用途
仅供科研实验
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞分离自胎盘组织;胎盘(placenta)是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官,由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在中发育,依靠胎盘从母体取得营养,而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的,是一个重要的器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代,胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合,以达到母子间物质的交换,这样的结构称假胎盘。绒毛膜是由滋养层和胚外中胚层的壁层构成。胚泡植入内膜后,在胚泡表面形成许多绒毛样的突起,以细胞滋养层为中轴,外裹合体滋养层,称初级干绒毛。胚外中胚层长入初级干绒毛的中轴,使初级干绒毛变成了次级干绒毛。当绒毛膜的胚外中胚层内形成血管网和结缔组织,并与胚体内的血管相通时,次级干绒毛改称三级干绒毛。三级干绒毛末端的细胞滋养层细胞形成细胞滋养层壳。随着胚胎发育,丛密绒毛膜与基蜕膜共同构成了胎盘,而平滑绒毛膜则和包蜕膜一起逐渐与壁蜕膜融合。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞采用胰蛋白酶-DNA酶联合消化法结合密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞经Cytokeratin-7荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
BigETELISAKit
狗15 - 酮基-13,14-二氢前列腺素F2α(15-keto-13,14-dihydro-PGF2α)elisa分析检测试剂盒
14-dihydro-PGF2α ELISA kit
人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)elisa分析检测试剂盒
HumanMCP-3ELISAkit
gp130结合蛋白GAM抗体 Anti-TLE5/Amino-terminal enhancer of split
Rap鸟嘌呤核苷酸交换因子2抗体 Anti-RAPGEF2/PDZ-GEF1
谷氨酸受体2C抗体(N端) Anti-NR2C/NMDAR2C
磷酸化血管扩张刺激磷蛋白抗体 Anti-Phospho-VASP(Ser157)
钾离子通道蛋白5抗体
KCNK5
细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2D抗体
CDKN2D/p19 INK4d
降钙素基因相关肽(CGRP)elisa分析检测试剂盒
冰冻切片脂肪组织染色试剂盒
小鼠含TCP1伴侣蛋白亚基2(CCT2)elisa检测试剂盒
大鼠白介素2可溶性受体β链(sIL-2Rβ)elisa检测试剂盒
环指蛋白215抗体
RNF215
肾病样蛋白1抗体
KIRREL1
粘结蛋白SA1抗体 Anti-SA1/Nuclear protein stromal antigen 1
细胞膜调控蛋白Paralemmin 1抗体 Anti-Paralemmin 1
原钙粘蛋白γB1抗体 Anti-PCDHGB1
泛素蛋白连接酶2N抗体 Anti-Ube2N/UBC13
胶体金标记的兔抗亲和素
大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞Rabbit Anti-Avidin / Gold
GalNAc-TL1蛋白抗体
GluR delta 1; GluR delta 1 subunit; GluR delta-1 subunit; Glutamate receptor delta 1 subunit; Glutamate receptor delta-1 subunit; Glutamate receptor ionotropic delta 1; GRID 1; Grid1; GRID1_HUMAN; KIAA1220.
大鼠胃黏膜上皮细胞
小鼠心室心肌细胞
HCT-8人结直肠癌癌细胞
BICR 16人鳞状细胞癌
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。