
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
大鼠卵泡膜细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
卵巢组织
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
分类
大鼠原代细胞
货号
A01X1638
用途
仅供科研实验
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
大鼠卵泡膜细胞分离自卵巢组织;卵巢是雌性动物的生殖器官,卵巢的功能是产生卵以及类固醇。卵巢的位置与睾丸相同,仅左侧发育(右侧已退化),呈葡萄状,均为处于不同发育时期的卵泡,卵泡呈黄色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢,但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构,而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于两侧的一对卵圆形的生殖器官,它的外表有一层上皮组织,其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分,主要由卵泡和结缔组织构成;髓质位于中央,由疏松结缔组织构成,其中有许多血管、管和神经。哺乳动物的卵巢内卵泡的发育需要相关的调节才能完成,垂体(卵泡刺和黄体**素)使原始卵泡开始发育,其过程中还产生大量的雌。雌是卵巢的颗粒细胞和卵泡膜细胞在垂体的作用下协同合成的,卵泡膜细胞合成的雄透过基膜进入颗粒细胞,并转变为雌。因此,卵泡膜细胞在生殖***调节中占有关键的位置,了解其在病理及生理中的作用,对于与性有关的妇产科(如多囊卵巢综合症、卵巢癌等)的研究有着重要意义。在哺乳动物卵泡生长发育的过程中,卵母细胞由不断增加的颗粒细胞层包裹。卵巢组织中的膜细胞作为卵泡的外层细胞可以维持卵泡结构的完整性,参与构成卵母细胞和颗粒细胞发育的微环境且为类固醇的**提供底物。在哺乳动物中调节膜细胞类固醇**的机制已见相关报道,但是有关卵泡膜细胞的聚集、生长和分化的研究尚不深入。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠卵泡膜细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠卵泡膜细胞经3β-HSD荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
IFN-α1ELISAKit
鸭白介素8(IL-8/CXCL8)elisa分析检测试剂盒
IL-8 ELISA Kit
人白细胞活化黏附因子(ALCAM)elisa分析检测试剂盒
HumanALCAMELISAKit
磷酸化SH2结构含磷酸肌醇SHIP1抗体 Anti-Phospho-SHIP1 (Tyr1020)
G蛋白结合蛋白RAB38抗体 Anti-RAB38
肿瘤转移抑制基因H4抗体 Anti-NME4/nm23-H4
软骨细胞蛋白39抗体 Anti-YKL39/CHI3L2
磷脂酸磷酸酶LPIN2抗体
Lipin 2
Bloom综合征相关蛋白抗体
BLM
弹性蛋白酶抑制剂抗体 Anti-SKALP/Elafin
抵抗素样分子α抗体 Anti-RELMa/RELM alpha
利钠肽受体A抗体 Anti-Natriuretic Peptide Receptor A
锌指蛋白568抗体 Anti-ZNF568
肌蛋白结合蛋白γ2抗体
SNTG2
粪生素氧化酶CPOX抗体
CPOX
跨膜蛋白SEMA5B抗体 Anti-SEMA5B/Semaphorin 5B
脂滴包被蛋白Perilipin-A抗体 Anti-Perilipin A
核苷酸内焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗体 Anti-ENPP1/PC1/3
肿瘤坏死因子配体超家族成员4抗体 Anti-TNFSF4/CD252
罗丹明标记小鼠IgG(型对照)
大鼠卵泡膜细胞Mouse IgG / RBITC
锌指蛋白83抗体
Forkhead box protein J1; FOXJ-1; winged helix; FOXJ1; FKHL13; HFH-4; HFH4; MGC35202; forkhead box J1; Forkhead Homologue 4; Forkhead related protein FKHL13; Fox J1; Hepatocyte nuclear factor 3 forkhead homolog 4; HNF-3/forkhead homolog 4; FOXJ1_HUMAN.
大鼠脉络膜微血管内皮细胞
鸭肝间质细胞
CFPAC-1人胰腺癌细胞
ACHN人肾细胞癌细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。