产品名称
大鼠海绵体内皮细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
海绵体组织
生长特性
贴壁
细胞形态
内皮细胞样
分类
大鼠原代细胞
货号
A01X1639
用途
仅供科研实验
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞简介：
大鼠海绵体内皮细胞分离自海绵体组织；海绵体是由海绵状的小梁和腔隙构成的血窦结构，它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中，而海绵体内皮细胞则覆盖于海绵体血窦的腔面，仅占海绵体组织的2.8%。在消化海绵体组织时，胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系，破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。如果消化时间延长或胶原酶浓度过大，平滑肌细胞和成纤维细胞也将被消化下来，从而影响海绵体内皮细胞的纯度。因此，比较筛选合适的胶原酶浓度和消化时间是成功分离海绵体内皮细胞的关键。
方法简介：
公司实验室分离的大鼠海绵体内皮细胞采用混合酶消化法结合机械分离法、并用内皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠海绵体内皮细胞经CD31荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
①动物处理：用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡，然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒（浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内，影响培养）后迅速置于的培养皿中，带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材：将乳鼠俯卧位，用乙醇进行一次背部，再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤，剖开腹部，取出肝脏放入另一培养皿中，除去其他连带组织，用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次，每次1~2 ml，洗去血污，将废液弃于废液杯中。
③组织分离：用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除，然后将肝组织反复剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小块后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次，弃废液。
④接种：用吸管加2滴小牛血清，小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液，然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地（组织块之间相距约0.5 cm左右）排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。
⑤培养：将培养瓶慢慢翻转，使瓶底向上，加入1~2 ml培养液，拧紧瓶盖，做好标记，置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时，待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后，再缓慢翻转培养瓶（尽量注意不要使组织块漂浮起来），另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块，将瓶盖调整在略微松弛状态，继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察：细胞接种后一般几个小时内即可贴壁，并开始生长。如果无污染且细胞生长良好，可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色，此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞，这时可进行传代培养。
原代细胞步骤：
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织，剔除包膜及坏死组织，无菌PBS清洗3-5次；切成约1mm3组织块；
2. 加入2mmol 的 EDTA，摇匀后放置冰上约 30-60min；
3. 离心，并加入胶原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期间，置于37°培养箱。每15min摇晃一次，消化时间根据肿瘤组织来定，约1-2h；
5. 待大部分组织块消化成透明状时，用 40μm 的细胞滤网过滤细胞，收集；
6. 用培养基重悬，置于培养箱培养。
公司正在出售的产品：
P-PKBELISAKit
大鼠N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体亚单位NR2 elisa分析检测试剂盒
Rat N-Methyl-D-Aspartate (NMDA) Receptor 2 (NR2) ELISA Kit
人骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa分析检测试剂盒
OT/BGPELISAkit
大鼠皮质酮（CORT）elisa检测试剂盒
CD56-APC
土壤淀粉酶测试盒
通用型密执安棒形杆菌狡诈亚种Clavibacter michiganensis subsp. insidiosus；CMI）基因检测试剂盒
三聚氰胺ELISA快速检测试剂盒
Melamine ELISA Kit
人白介素2(IL-2)抗体elisa分析检测试剂盒
HumanIL-2antibodyELISAKit
β-葡萄糖苷酶（β-GC）/纤维二糖水解酶测试盒
小鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)elisa检测试剂盒
猫雌二醇(E2)elisa分析检测试剂盒
强化染色试剂盒
OSGIN2蛋白抗体
OSGIN2
HEAT重复内含蛋白7A蛋白抗体
HEATR7A
微管蛋白γ/Tubulin γ抗体 Anti-gamma tubulin (Centrosome Marker )
肝磷酸酯酶2抗体 Anti-PRL2/PTP4A2
磷酸酯酶3蛋白抗体 Anti-PRL3/PRL-R
丝氨酸/精氨酸相关核基质蛋白1抗体 Anti-SRRM1
辣根过氧化物酶标记的小鼠抗大鼠IgG H&L
大鼠海绵体内皮细胞Mouse Anti-Rat IgG H&L / HRP
FbxL7蛋白抗体
cytoskeletal-associated protein tyrosine phosphatase; protein tyrosine phosphatase H1; protein tyrosine phosphatase non-receptor type 3; Protein-tyrosine phosphatase H1; PTN3_HUMAN; PTP H1; PTP-H1; PTPH1; PTPN3; Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 3.
大鼠海绵体平滑肌细胞
猪肺微血管内皮细胞
BEWO人胎盘绒毛膜癌细胞
A-427人非小细胞肺癌细胞