培养方法与步骤：
①动物处理：用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡，然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒（浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内，影响培养）后迅速置于的培养皿中，带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材：将乳鼠俯卧位，用乙醇进行一次背部，再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤，剖开腹部，取出肝脏放入另一培养皿中，除去其他连带组织，用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次，每次1~2 ml，洗去血污，将废液弃于废液杯中。
③组织分离：用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除，然后将肝组织反复剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小块后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次，弃废液。
④接种：用吸管加2滴小牛血清，小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液，然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地（组织块之间相距约0.5 cm左右）排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。
⑤培养：将培养瓶慢慢翻转，使瓶底向上，加入1~2 ml培养液，拧紧瓶盖，做好标记，置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时，待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后，再缓慢翻转培养瓶（尽量注意不要使组织块漂浮起来），另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块，将瓶盖调整在略微松弛状态，继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察：细胞接种后一般几个小时内即可贴壁，并开始生长。如果无污染且细胞生长良好，可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色，此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞，这时可进行传代培养。
产品名称
大鼠肺成纤维细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
肺组织
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
分类
大鼠原代细胞
货号
A01X1524
用途
仅供科研实验
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞简介：
大鼠肺成纤维细胞分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系（指气管、支气管等）与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。肺成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持肺器官的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
方法简介：
公司实验室分离的大鼠肺成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠肺成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
鱼类受精卵细胞冻存试剂盒（低温）
小鼠血小板衍生生长因子CC(PDGF-CC)elisa检测试剂盒
大鼠结缔组织生长因子(CTGF)elisa分析检测试剂盒
组织磷酸二酯酶5（PDE5）活性酶连续循环定磷比色法定量检测试剂盒
人生长分化因子-15（GDF-15）elisa检测试剂盒
犬17羟孕酮(17-OHP)elisa检测试剂盒免费代测
/酵母胱硫醚-γ-合成酶（cystathionine γ-synthase；CGS）活性荧光定量检测试剂盒
小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)elisa分析检测试剂盒
大鼠顶体蛋白(ACR)elisa检测试剂盒
细胞色素C氧化酶7A2样蛋白抗体 COX7A2L
细胞粘合素(固生蛋白)抗体 Tenascin C
X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白单克隆抗体 XIAP
β-半乳糖苷 alpha2-3 唾液酸转移酶抗体 ST3GAL4
APC标记人CD8单克隆抗体 human CD8-APC
A型禽流感病毒H1N1蛋白抗体 H1N1 Matrix Protein 1
跨膜γ羧基酸蛋白2抗体 PRRG2
蛋白激酶3抗体 FER
整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体 ADAMTS12
中心体肌动蛋白γ1/增强型PI3K蛋白抗体 Centaurin gamma 1
甘氨酸受体α3/GlyR α3抗体 Glycine Receptor alpha 3
干扰素诱导35蛋白抗体 IFI35
KDELR3蛋白抗体 KDELR3
LASP1蛋白抗体 LASP1
驱动蛋白家族成员3B抗体 KIF3B
溶质载体家族22成员10抗体 SLC22A10
人α1微球蛋白/bikunin前体(AMBP)elisa检测试剂盒
大鼠肺成纤维细胞血清脊髓过氧化酶（MPO）活性高质敏感（DTNB）比色法定量检测试剂盒
小鼠胶质细胞系来源神经营养因子(GDNF)elisa检测试剂盒
C9 deficiency; C9a; C9 deficiency with dermatomyositis; CO9_HUMAN; Complement component 9; Complement component 9 deficiency; Complement component C9a; Complement component C9a; C9.
大鼠肺动脉内皮细胞
猪胰腺腺泡上皮细胞
95-D人高转移肺癌细胞
4T1+luc小鼠乳腺癌细胞荧光素酶标记
原代细胞步骤：
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织，剔除包膜及坏死组织，无菌PBS清洗3-5次；切成约1mm3组织块；
2. 加入2mmol 的 EDTA，摇匀后放置冰上约 30-60min；
3. 离心，并加入胶原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期间，置于37°培养箱。每15min摇晃一次，消化时间根据肿瘤组织来定，约1-2h；
5. 待大部分组织块消化成透明状时，用 40μm 的细胞滤网过滤细胞，收集；
6. 用培养基重悬，置于培养箱培养。