
培养方法与步骤:
①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。
⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
产品名称
大鼠成骨细胞
产品规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
组织来源
颅骨组织
生长特性
贴壁
细胞形态
梭形、多角形
分类
大鼠原代细胞
货号
A01X1647
用途
仅供科研实验
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
大鼠成骨细胞分离自颅骨组织;颅骨位于脊柱上方,由23块形状和大小不同的扁骨和不规则骨组成。除下颌骨及舌骨外,其余各骨彼此借缝或软骨牢固连结,起着保护和支持脑、感觉器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。颅分脑颅和面颅两部分。脑颅位于颅的后上部,内有颅腔,容纳脑,共8块。面颅为颅的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等结构,构成面部的支架,共15块。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞,负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨不断地进行着重建,骨重建过程包括破骨细胞贴附在旧骨区域,分泌酸性物质溶解矿物质,分泌蛋白酶消化骨基质,形成骨吸收陷窝;其后,成骨细胞移行至被吸收部位,分泌骨基质,骨基质矿化而形成新骨;破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。成骨细胞培养不仅有助于了解骨形成机制、骨骼系统的分子和细胞学基础,也是筛选、生物材料开发和生物工程研究的重要手段。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠成骨细胞采用先用胰蛋白酶短时间消化、后用胶原酶反复消化制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠成骨细胞经ALP染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
eosinophil-derivedneurotoxin)(RNASE2)ELISAkit
猴促肾上腺皮质(ACTH)elisa分析检测试剂盒
ACTH ELISA kit
人二羟基赖正己氨酸(DHLNL)elisa分析检测试剂盒
DHLNLELISAkit
β-Actin 100ul
(SCHMORL)直接染色试剂盒
兔胆碱乙酰转移酶(CHAT)elisa分析检测试剂盒
通用型精(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒
INE1蛋白抗体
INE1
补体C1qTNF9链多肽抗体
C1QTNF9
细胞IP3R受体蛋白表达比色法定量检测试剂盒
犬α1微球蛋白(α1-MG)elisa检测试剂盒
大鼠12羟二十烷四烯酸(12-HETE)elisa检测试剂盒免费代测
小鼠可溶性CD40配体(sCD40L)elisa检测试剂盒免费代测
蛋白酶体PSMβ6抗体
Proteasome 20S beta 6
细胞纤毛内转运源蛋白122抗体
IFT122
肌营养蛋白相关蛋白1抗体 Anti-Utrophin
血小板衍化生长因子γ抗体 Anti-PAFAH1B3/PAFAHG
肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基5抗体 Anti-p16 ARC/ARPC5
分拣微管连接蛋白抗体 Anti-SNX25
辣根过氧化物酶标记的驴抗羊IgG H&L
大鼠成骨细胞Donkey Anti-Goat IgG H&L / HRP
FRG2B蛋白抗体
F protein binding protein 1; bA165P4.3; FBP; GTPase RAB 14; RAB-14; RAB14 member RAS oncogene family; RAB14_HUMAN; Ras related protein Rab 14; Ras-related protein Rab-14; RP11 165P4.4; Small GTP binding protein RAB14; FBP.
大鼠大隐静脉内皮细胞
猪主动脉瓣膜间质细胞
786-O[786-0]人肾透明细胞腺癌细胞
3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纤维细胞
原代细胞步骤:
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。