
商品属性:
产品名称
英文名称
CaSKi:CaSKi
产品货号
A01X684
培养条件
气相:95%空气+5%二氧化碳;
生长特性
贴壁生长
细胞形态
上皮细胞样
产品种属
人
冻存条件
无血清冻存液,液氮储存
组织来源
;宫颈癌肠转移
用途
仅供科研研究实验
商品详情:
细胞别称:Ca-Ski; CaSki; Caski; CASKI;人宫颈癌上皮细胞
种属来源:人
年龄性别:女;40岁
组织来源:;宫颈癌肠转移
生长特性:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样
背景简介:Ca Ski细胞是从小肠肠系膜转移灶建立的。据报道,它含有完整的HPV-16(每个细胞大约600个拷贝)和HPV-18相关序列。可产生hCGβ亚单位、肿瘤相关抗原。
生物等级:2
细胞规格:1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测:无
基因表达情况:beta subunit of human chorionic gonadotropin (hCG); tumor associated antigen
保藏机构:ATCC; CRL-1550 ATCC; CRM-CRL-1550 ATCC; CRL-7915 BCRC; 60251 ECACC; 87020501;中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心
培养基:90% RPMI-1640+10% FBS+PS
培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
倍增时间:~60-80 hours
STR鉴定位点Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:8,12;D16S539:11,12;D18S51:17;D19S433:15,16;D21S11:30;D2S1338:21;D3S1358:15;D5S818:13;D7S820:8,11;D8S1179:15;FGA:21;TH01:7;TPOX:8;vWA:17;

细胞培养操作:

1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

细胞传代培养操作步骤:

(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存。
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