
抗体修复方法:
方法1:沸水浴修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境,保持外部沸腾状态15min,自然冷却至室温;
方法2:微波修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中,高火5min,停火3min,中火5min,自然冷却至室温。
类标记抗体相关验室指导:脱片的原因可能有以下几点:
(1)切片在脱蜡之前没有进行烤片,一般片子在做之前需烤片。 烤片的目的是将带有蜡的组织切片牢固地黏在载玻片上,以免染色过程中切片脱落。切片在56—60℃的恒温箱中至少放置1小时才能达到此目的,但是,通常的烤片温度为;8~60℃,时间为2—6小时。由于高温干燥可加速组织中抗原的氧化,因此高温烤片对抗原有破坏作用;
(2)在贴片前,载玻片处理的不够干净。处理载玻片的步骤:洗涤剂洗-水洗-过酸-水洗-酒精浸泡-晾干-多聚赖氨酸挂片-晾干备用;
(3)粘片剂涂的太少或是粘片剂配得浓度不够。一般用0.1 mg/ml的多聚赖氨酸进行包被。多聚赖氨酸在水溶液中易分解,所以一次不要配太多工作液。配制多聚赖氨酸溶液使用超纯水(每100mL已稀释的多聚赖氨酸溶液要包被的玻片40-90张, 超过90张片子将影响其黏合力),释过的多聚赖氨酸溶液要放在2-8℃,至少在3个月内是稳定的;
(4)展片:一定要展开,尽量等标本完全展平在往载玻片上贴!而且贴的时候不要有气泡,如果展片不好的话,可以多烤一会。掉片也会有是这个原因,特别是标本面积很小的;
(5)切片时尽量要薄(3-5微米),平展不要有皱折,组织块本身不要太大。脂肪组织和软骨组织本身容易脱片;
(6)如果掉片很多的话,可以考虑ihc过程中的每一步水洗时间尽量缩短(在不影响结果的情况下)。
保存条件存储:在- 20°C为一年。避免重复冻融循环。冻干抗体稳定在至少一个月室温超过一年保持在20°当用无菌PBS pH 7.4缓冲或稀释的抗体抗体稳定至少两周在2-4°C.本公司产品仅用于科研实验。
产品名称 |
上海抚生低分子量神经丝蛋白抗体 |
英文名称 |
Anti-NF-L |
规格 |
100ul |
货号 |
K217060 |
【相关标记有】:
Alexa Fluor 350 标记、Alexa Fluor 488 标记、Alexa Fluor 555 标记、Alexa Fluor 647 标记、AP标记、APC标记、Biotin标记、Cy3标记、Cy5标记、Cy5.5标记、Cy7标记、FITC标记、Gold标记、HRP标记、PE标记、PE-Cy3标记、PE-CY5标记、PE-CY5.5标记、PE-CY7标记、RBITC标记.
抗体溶解方法:
方法一:我们的抗体(冻干粉)已经包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐剂(叠氮钠或庆大霉素),您只需要加入的双蒸水就行了。抗体溶解后,置于-20℃保存,好分装后使用,避免反复冻融,可保证至少1年有效;
方法二:也可以只加入一半体积的双蒸水,再用一半体积的甘油补足,置于-20℃保存,这样抗体不会冻,有利于抗体的稳定。
后续试验时,再使用对应的缓冲液稀释成工作液,即用即配。
我们的抗体(冻干粉),在常温放置下,至少一个月有效;若在-20℃下保存(推荐),至少三年有效。
Peroxidase(POD) 辣根过氧化物酶 10mg 支
兔抗生物素-HRP 0.1ml 支
Gambogic acid 藤黄酸 2752-65-0 20mg
D2000 DNA Ladder 50T 支
Sec-O-Glucosylhamaudol 亥茅酚苷 80681-44-3 20mg
OVA-FITC 5ml 支
Casein 酪蛋白(不溶于中性水) 100g 瓶
Mayer’苏木素染液(**组化) 100ml 瓶
Cedar oil 香柏油 25ml 瓶
上海抚生低分子量神经丝蛋白抗体猪白介素12(IL-12)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒 J82(膀胱癌细胞) 5×106cells/瓶×2
大鼠脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 JAR(胎盘绒毛膜癌细胞) 5×106cells/瓶×2
禽白血病J亚型(ALV-J)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒 JEG-3(绒毛膜癌细胞) 5×106cells/瓶×2
人风疹病毒IGM(RV-IgM)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒 JeKo-1(套细胞**瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 Jurkat, Clone E6-1 (急性T**细胞白血病细胞) 5×106cells/瓶×2
人转化生长因子α(TGF-α)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 K-562(慢性骨髓性白血病细胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠甲状旁腺**相关蛋白(PTHrP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 KB(口腔表皮样癌细胞) 5×106cells/瓶×2
猪**球蛋白M(IgM)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 KG-1(急性骨髓性白血病细胞) 5×106cells/瓶×2
大鼠神经生长因子(NGF)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 KLE(**内膜癌细胞) 5×106cells/瓶×2
人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 L1210(小鼠白血病细胞) 5×106cells/瓶×2
人17β-雌醇(17β-Estradiol)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒 KU812(外周血嗜碱性白血病细胞) 5×106cells/瓶×2